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1、如何看荧光定量PCR的结果
按公式计算:对照组-Ct =对照组(Ct 目的基因-Ct 内参基因)-对照组(Ct 目的基因-Ct 内参基因)
2、荧光定量PCR的结果(CT值)怎么分析
目的基因荧光达到阈值时的循环数~Ct值越低代表起始模板数量越大~
3、miRNA荧光定量PCR结果怎么看
荧光定量我用罗氏的反应速度算是相当快的,在样本处理(提出核酸)后,放在荧光定量PCR仪器上一般需要30分钟~1小时左右.但是如果你的样本比如支原体的含量非常高,可能在没有运行结束已经可以看出结果了,但是如果说5分钟就出结果了,确实太快了点.如果是realtime做表达量,用excel的制图,将每个个体的Ct值平均数做出柱状图就可以了。如果你还做了标曲的话,就用制图中的散点图看R2值。 其实这些功能做定量PCR的时候电脑程序应该会自动分析才对。 具体情况具体分析。
4、如何分析荧光定量pcr实验结果?
如果是realtime做表达量,用excel的制图,将每个个体的Ct值平均数做出柱状图就可以了。如果你还做了标曲的话,就用制图中的散点图看R2值。
其实这些功能做定量PCR的时候电脑程序应该会自动分析才对。
具体情况具体分析。
Www.nfYSW.&CoM
5、乙肝dna荧光定量PCR结果怎么看病毒数量
8.66表示lg(病毒数)=8.66、即病毒数=10^8.66=457088189.6拷贝
参考范围是0-3即0-1000拷贝
检测结果已超出参考范围,表明乙肝病毒呈阳性
6、荧光定量pcr扩增结果怎么表示
实时荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。
检测指标是:各样品的目的基因和管家基因分别进行Realtime PCR反应。PCR产物与 DNA Ladder在2%琼脂糖凝胶电泳,GoldView染色,检测PCR产物是否为单一特异性扩增条带。
原理:
PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
7、实时荧光定量PCR与普通PCR的区别是什么?结果有何异同?能说明的问题是什么?
二者结果相同。都能说明生物体外的特殊DNA复制的整个过程的扩增效率和溶解温度情况。
1. 首先设置好内参和对照组(在 Analysis Settings 处),一般我们在上机前会对应设置好的,如果设置好的话可以直接跳至第 3 点。
2. 点击进去后,选择对应好的内参和对照组。
3.选择好内参和对照组后,我们首先看看 PCR 跑的有没有问题。
4. 溶解曲线:表示随温度升高 DNA 的双螺旋结构降解程度的曲线。
5. 如果前面的几项都没有太大的问题的话。最后我们看看最重要的结果,也就是目的基因的变化情况了。
首先,看测序峰图,如果结果的彩图显示峰型是尖锐单一的,碱基所对应的编码是一致的,那么可以判断序列是可以使用的.如果出现双峰,信号中断等异常现象,那么需要重新制备或者克隆后再测序. 其次,将PCR产物在NCBI上blast,看是否与你预期想要的片段符合,如果是匹配度一致,那么可以进行下一步,例如克隆,表达等.如果是匹配度不高,那么建议重新制备,最好是采用touchdown或巢式PCR等方法,提高产物的特异性后再扩增测序. 另外,如果是做SNP分析的,那么需要你通过看测序彩图,找出相应的突变杂合位点.
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